FACS binding assay for analysing GDNF interactions

胶质细胞源性神经生长因子 GDNF配体家族 受体 离解常数 神经营养因子 配体结合分析 细胞生物学 化学 细胞培养 分子生物学 生物 生物化学 遗传学
作者
Luis Quintino,Aurélie Baudet,Jonas Larsson,Cecilia Lundberg
出处
期刊:Journal of Neuroscience Methods [Elsevier]
被引量:2
标识
DOI:10.1016/j.jneumeth.2013.04.006
摘要

Glial cell-line derived neurotrophic factor (GDNF) is a secreted protein with great therapeutic potential. However, in order to analyse the interactions between GDNF and its receptors, researchers have been mostly dependent of radioactive binding assays. We developed a FACS-based binding assay for GDNF as an alternative to current methods. We demonstrated that the FACS-based assay using TGW cells allowed readily detection of GDNF binding and displacement to endogenous receptors. The dissociation constant and half maximal inhibitory concentration obtained were comparable to other studies using standard binding assays. Overall, this FACS-based, simple to perform and adaptable to high throughput setup, provides a safer and reliable alternative to radioactive methods.
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