人结肠癌奥沙利铂耐药细胞HCT116/L-OHP的建立及其耐药机制初探

目的：建立人结肠癌奥沙利铂（oxaliplatin,L-OHP）耐药细胞HCT116/L-OHP,并初步探讨其可能的耐药机制。方法：通过逐步增加作用于亲代细胞HCT116的L-OHP浓度与间断大剂量L-OHP作用,建立耐药细胞HCT116/L-OHP;MTT法检测L-OHP、5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）、顺铂（cisplatin）和7-乙基-10-羟基喜树碱（7-ethyl-10-hydrol-camptothecin,HCPT）对HCT116和HCT116/L-OHP细胞的细胞毒性;蛋白质印迹法检测相关耐药蛋白的表达;基因芯片检测信号通路的改变。结果：成功构建了稳定耐药的耐药细胞HCT116/L-OHP,耐药倍数为17倍,与5-FU、DDP和HCPT有不同程度的交叉耐药性。与HCT116细胞比较,HCT116/L-OHP细胞中P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）、肺耐药蛋白（lung resistance protein,LRP）和谷胱甘肽S转移酶（glutathione S-transferase,GST）的表达上调（P〈0.01）,9条信号通路上调（P〈0.05）,其中细胞周期信号通路上调最明显,p53信号通路次之。结论：HCT116/L-OHP细胞具有稳定的耐药性,其耐药机制可能与细胞耐药蛋白表达、细胞周期和p53信号通路表达上调有关。