고들빼기 추출물이 인지질막 Liposome의 안정성 및 유동성에 미치는 영향

인지질 liposome의 안정성과 유동성에 대한 고들빼기 추출물의 영향을 알아보기 위해 여러 종류의 인지질을 만들어 실험한 결과 PC계 인지질 중 DPPC를 사용하여 인지질 liposome을 만들고, 막안정성에 대한 영향을 calcein을 봉입한 liposome에 형광자가소광법으로 측정하였으며, 막유동성에 대한 영향은 fluorescence polarization 방법으로 측정하였고 그 결과는 다음과 같다. Phosphatidylcholine(PC)계 인지질 중 acyl chain의 C수가 14개인 dimyristoyl phosphatidylcholine(DMPC)과 C수가 16개인 dipalmitoyl phosphahdylcholine(DPPC) 및 여러 인지질의 혼합물인 egg phospatidylcholine(egg PC)을 사용하여 liposome 형성의 안정화와 막안정화에 대한 비교 실험을 하였다. 이중 liposome의 안정성이 가장 좋은 것은 egg PC였고, DPPC 그리고 DMPC의 순으로 calcein의 leakage %가 저하하였다. 콜레스테롤을 농도의 순으로 첨가시킨 DPPC liposome을 만들었을 때, calcein leakage%는 DPPC만의 liposome보다 훨씬 감소하여 막안정성에 영향을 미치는 콜레스테롤의 중요 역할을 확인하였다. 그리하여 고들빼기 추출물이 콜레스테롤과 같이 막의 물리화학적인 면과 생리활성적인 면에서 중요 역할을 하는지의 여부를 비교 검토하였다. DPPC liposome에 고들빼기 butanol과 hexane 추출물을 가한 결과, hexane 추출물의 막안정화에 미치는 영향이 butanol 추출물보다 현저하였으며 이 경향은 콜레스테롤을 농도별로 가했을 때와 거의 비슷함을 보여주었다. 이와같은 경향은 또한 인지질 liposome에 다른 약물을 첨가했을 경우 calcein의 leakage% 정도보다 훨씬 그 영향이 탁월함을 보여주었다. 즉 고들빼기 hexane 추출물의 소수성 부분은 인지질 liposome의 상전이온도 이하(Tm. 41~42℃)인 25℃에서 지질 이중층의 rigid한 부분의 공간속으로 깊숙히 들어가 막안정성 증가에 의한 인지질막의 condensing effect에 현저한 영향을 미침을 알 수 있었다. Liposome에 DPH로 labeling한 후 온도 증가에 따른 DPH의 fluorescence polarization값(P)의 측정에서 DPPC만으로 만든 lipsome의 경우 상전이온도 이전의 결정 상태에서 상전이온도(phase transition temperature, Tm)로 되면서 P 값이 현저히 저하하였으며, 고들빼기 추출물을 농도별로 첨가했을 때는 상전이온도 전후에서 DPPC 만의 liposome보다 P값의 감소가 더욱 뚜렷해 해졌으며 이 결과에서 상전이온도 이전에서의 고들빼기 추출물의 막유동성 증가 효과를 읽을 수 있었다. 각 추출물의 생리활성이 있는 분자구조가 아직 연구 중에 있는 현시점에서는 고들빼기 추출물과 분획물들의 구조 중 소수성부분이 인지질 이중층의 탄화수소의 꼬리부분에 침투되어 더 많이 존재하고 있음을 유추할 수 있었다. 이상의 결과에서 고들빼기 hexane 추출물과 그 분획물 H₁, H₂ 및 H₃의 소수성 부분은 인지질 liposome의 이중층으로 깊숙히 들어가서 막안정성과 막유동성을 증가시키므로써 고들빼기 첨가물이 인지질 세포막에 대한 생리적 활성을 일으킬 수 있는 촉진제로서의 가능성을 시사해 준다고 보겠다.