华支睾吸虫重组14-3-3ε蛋白对胆管癌CCLP-1细胞迁移侵袭的作用研究

目的探讨华支睾吸虫重组14-3-3e蛋白（r Cs14-3-3e）对肝内胆管癌细胞株CCLP-1细胞波形蛋白（vimentin）表达的影响,观察该过程中CCLP-1细胞侵袭和迁移能力的变化。方法用不同浓度（1、5、10μg/ml）r Cs14-3-3e与CCLP-1细胞共孵育24、48、72 h后,通过Q-PCR、Western blot等实验方法检测vimentin的表达水平。用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测r Cs14-3-3e对CCLP-1细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 Q-PCR实验表明5μg/ml r Cs14-3-3e刺激CCLP-1细胞72 h后及10μg/ml r Cs14-3-3e刺激CCLP-1细胞24、48、72 h后,vimentin m RNA水平显著上调;Western blot实验显示,10μg/ml r Cs14-3-3e刺激CCLP1细胞48、72 h后,vimentin蛋白水平显著上调。划痕实验表明,r Cs14-3-3e（10μg/ml）能够促进细胞的迁移能力,处理后的细胞迁移率增大（P〈0.01）;Transwell小室检测显示,r Cs14-3-3e（10μg/ml）处理组中穿膜细胞数为对照组的1.78倍,显著增加（P〈0.05）。结论 r Cs14-3-3e可以通过上调vimentin蛋白的表达,从而促进肝内胆管癌细胞株CCLP-1的侵袭和迁移能力。