Mast cell-derived chemokine C-C motif ligand 5 affects the migration of CD8+ T cells in vitiligo under oxidative stress

摘要: 【摘要】 目的 探讨氧化应激状态下肥大细胞来源的趋化因子配体5(CCL5)对白癜风CD8+ T细胞迁移的影响。方法 选取2017年1月至2023年1月于西京皮肤医院确诊为进展期节段型白癜风患者、非节段型白癜风患者及健康人各10例,采用甲苯胺蓝染色分析肥大细胞在皮损浸润的特征。构建Transwell小室模型观察H2O2处理对肥大细胞的影响,Transwell上室中均加入由患者外周血制备的单个核细胞(PBMC),在下室中分别加入不同处理的人肥大细胞系LAD2细胞,分别为无特殊处理(未处理组),H2O2预处理(H2O2组),H2O2预处理后加入CCL5/RANTES中和抗体(H2O2 + 中和抗体组),H2O2预处理后加入Janus激酶3/非受体蛋白酪氨酸激酶选择性抑制剂PF-06651600(H2O2 + PF组)。共孵育6 h后收集下室细胞悬液,采用流式细胞仪检测CD8+ T细胞数目,应用酶联免疫吸附试验检测上清液中CCL5水平。采用单因素方差评估分析组间差异,组内两两比较采用LSD-t检验。采用Pearson法进行相关性分析。结果 节段型、非节段型白癜风患者皮损及健康人皮肤中浸润的肥大细胞数在200 倍视野下观察分别为(15.7 ± 3.3)个、(20.9 ± 3.9)个、(7.2 ± 2.9)个,差异有统计学意义(F = 8.07,P = 0.002),节段型、非节段型白癜风患者皮损浸润的肥大细胞数高于健康人皮肤(LSD-t = 3.50、5.70,P = 0.047、0.001),两型白癜风皮损间差异无统计学意义(LSD-t = 2.20,P = 0.293)。白癜风患者皮损中浸润的肥大细胞与CD8+ T细胞数呈显著正相关(r = 0.82,P=0.004)。未处理组、H2O2组、H2O2 + 中和抗体组、H2O2 + PF组CD8+ T细胞数量(197.0 ± 45.9、580.4 ± 62.6、296.0 ± 43.2、398.6 ± 62.8)、CCL5水平[(2.2 ± 0.6)、(9.9 ± 1.3)、(3.4 ± 0.4)、(6.33 ± 0.7) pg/ml]差异均有统计学意义(F = 11.03、17.77,均P < 0.001),H2O2组CD8+ T细胞数量、CCL5水平均高于未处理组、H2O2 + 中和抗体组、H2O2 + PF组(均P < 0.05)。结论 氧化应激下肥大细胞参与白癜风发病,其来源的CCL5可以通过影响CD8+ T细胞迁移参与疾病的发生、发展。