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Single-Cell Capture, RNA-seq, and Transcriptome Analysis from the Neural Retina

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作者
Rachayata Dharmat,Sangbae Kim,Yumei Li,Rui Chen
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 159-186 被引量:9
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-0175-4_12
摘要

Single-cell RNA sequencing (scRNA-seq) is an emerging technology that can address the challenge of cellular heterogeneity. In the last decade, the cost per cell has been dramatically reduced, and the throughput has been increased by 104-fold. Like many other tissues, the retina is highly heterogeneous with an estimated of over 100 subtypes of neuronal cells. Here, we describe the current techniques to perform scRNA-seq on the adult retinal tissue including retinal dissection, retinal dissociation, assessment of cell population, cDNA synthesis, library construction, and next-generation sequencing. In addition, we introduce a workflow of scRNA-seq data analysis using open-source tools.
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