Preparation and incubation of precision-cut liver and intestinal slices for application in drug metabolism and toxicity studies

琼脂糖 毒性 离体 化学 药物代谢 新陈代谢 肝组织 体内 体外 生物 生物化学 细胞生物学 生物技术 有机化学 内分泌学
作者
Inge A.M. de Graaf,Peter Olinga,Marina H. de Jager,Marjolijn T. Merema,Ruben de Kanter,Esther G. van de Kerkhof,Geny M. M. Groothuis
出处
期刊:Nature Protocols [Nature Portfolio]
卷期号:5 (9): 1540-1551 被引量:395
标识
DOI:10.1038/nprot.2010.111
摘要

Precision-cut tissue slices (PCTS) are viable ex vivo explants of tissue with a reproducible, well defined thickness. They represent a mini-model of the organ under study and contain all cells of the tissue in their natural environment, leaving intercellular and cell-matrix interactions intact, and are therefore highly appropriate for studying multicellular processes. PCTS are mainly used to study the metabolism and toxicity of xenobiotics, but they are suitable for many other purposes. Here we describe the protocols to prepare and incubate rat and human liver and intestinal slices. Slices are prepared from fresh liver by making a cylindrical core using a drill with a hollow bit, from which slices are cut with a specially designed tissue slicer. Intestinal tissue is embedded in cylinders of agarose before slicing. Slices remain viable for 24 h (intestine) and up to 96 h (liver) when incubated in 6- or 12-well plates under 95% O(2)/5% CO(2) atmosphere.
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