TRV介导的E3泛素连接酶基因 NbE3R14 沉默对烟草基础免疫及南方根结线虫寄生的影响

[目的]本文旨在研究E3泛素连接酶基因的沉默对植物基础免疫及线虫寄生的影响，为揭示植物寄生线虫侵染寄主的分子机制提供理论依据。[方法]利用烟草脆裂病毒（TRV）介导的基因沉默技术（VIGS）沉默本氏烟E3泛素连接酶基因NbE3R14，用flg22处理基因沉默烟草叶片，RT-qPCR检测PTI（病原相关分子模式触发免疫，PAMPs-triggered immunity）相关基因的表达水平；接种辣椒疫霉于基因沉默烟草叶片，观察叶片病斑症状；采用室内人工接种法测定靶基因的沉默对南方根结线虫寄生的影响。[结果] RT-qPCR检测显示：农杆菌转化的烟草植株中NbE3R14基因已被成功沉默，flg22处理基因沉默烟草叶片激发的PTI相关基因GRAS2、WRKY7及WRKY8表达量分别下降41.3%、63.9%及61.8%，与野生型对照（WT）相比均有显著性差异（P < 0.05）；接种辣椒疫霉36 h后，TRV∷NbE3R14处理烟草叶片的病斑比WT增大28.5%；南方根结线虫在TRV∷NbE3R14处理植株上产生的根结数、雌虫数及卵块数与WT相比分别显著增加22.1%、27.4%和17.2%（P < 0.05），单卵块卵量则没有差异；而在TRV∷GFP处理植株上产生的根结数、雌虫数、卵块数以及单卵块卵量与WT均无明显差异。[结论]沉默NbE3R14基因能干扰植物基础免疫，从而导致烟草对辣椒疫霉及南方根结线虫的侵染更为感病。