Expression profile of key genes involved in DNA repair mechanisms in bovine cumulus cells cultured with bovine serum albumin or fetal calf serum

牛血清白蛋白 胎牛血清 生物 基因表达 卵母细胞 体外 信使核糖核酸 体外成熟 基因 分子生物学 细胞凋亡 男科 卵丘 细胞生物学 免疫学 遗传学 胚胎 医学
作者
André Lucio Fontana Goetten,J. Koch,Cecília Constantino Rocha,Alceu Mezzalira,Christopher A. Price,Valério Marques Portela,Marcos Henrique Barreta
出处
期刊:Reproductive Biology [Elsevier BV]
卷期号:23 (1): 100709-100709 被引量:5
标识
DOI:10.1016/j.repbio.2022.100709
摘要

Cumulus cells from cumulus-oocyte complexes (COC) matured in vitro in serum-free medium show high incidence of apoptosis and DNA double-strand breaks (DSB). This study aimed to characterize the transcript expression profile of selected genes involved in DNA repair mechanisms in bovine cumulus cells cultured with bovine serum albumin (BSA) or fetal calf serum (FCS). Briefly, bovine cumulus-oocyte complexes were in vitro matured with either, 0.4% BSA or 10% FCS for 3, 6, 12 or 24 h. The total RNA of cumulus cells was used for real-time PCR analysis. Transcript abundance of XRCC6, XRCC5, DNAPK, GAAD45B, TP53BP1, RAD50, RAD52, ATM and BRCA2 target genes changed as the IVM proceeded (P < 0.05). However, an interaction between protein source (FCS or BSA) and time was not detected (P ≥ 0.05). Cumulus cells from COCs matured with BSA presented higher mRNA expression of two genes compared to FCS group: TP53BP1 at 6 h and BRCA1 at 3, 6, 12 and 24 h (P < 0.05). In summary, our results showed for the first time the expression profile of the key genes involved in DSB repair mechanisms in cumulus cells obtained from bovine COCs matured with FCS or BSA. The higher mRNA expression of BRCA1 and TP53BP1 and lower mRNA expression of TNFAIP6 suggests an increase in apoptosis rate and DNA damage in cumulus cells cultured in BSA-supplemented medium and may explain, at least to some extent, the reduced developmental potential of bovine oocytes matured in serum-free medium.
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