Light-inducible protein degradation in E. coli with the LOVdeg tag

光遗传学 德隆 合成生物学 Lac抑制因子 蛋白质工程 代谢工程 抑制因子 蛋白质降解 模块化(生物学) 大肠杆菌 生物 计算生物学 细胞生物学 生物化学 遗传学 转录因子 基因 泛素 神经科学 泛素连接酶
作者
Nathan Tague,Cristian Coriano-Ortiz,Michael B. Sheets,Mary J. Dunlop
出处
期刊:eLife [eLife Sciences Publications Ltd]
卷期号:12 被引量:3
标识
DOI:10.7554/elife.87303.3
摘要

Molecular tools for optogenetic control allow for spatial and temporal regulation of cell behavior. In particular, light-controlled protein degradation is a valuable mechanism of regulation because it can be highly modular, used in tandem with other control mechanisms, and maintain functionality throughout growth phases. Here, we engineered LOVdeg, a tag that can be appended to a protein of interest for inducible degradation in Escherichia coli using blue light. We demonstrate the modularity of LOVdeg by using it to tag a range of proteins, including the LacI repressor, CRISPRa activator, and the AcrB efflux pump. Additionally, we demonstrate the utility of pairing the LOVdeg tag with existing optogenetic tools to enhance performance by developing a combined EL222 and LOVdeg system. Finally, we use the LOVdeg tag in a metabolic engineering application to demonstrate post-translational control of metabolism. Together, our results highlight the modularity and functionality of the LOVdeg tag system and introduce a powerful new tool for bacterial optogenetics.

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