Rapid Isolation of Functional Synaptic Vesicles from Tissues Through Cryogrinding, Ultracentrifugation, and Size Exclusion Chromatography

突触小泡 小泡 超离心机 高尔基体 人口 化学 内质网 生物 生物化学 社会学 人口学
作者
Huinan Li
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 121-130
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-1916-2_10
摘要

Many biochemical and biophysical related questions require the isolation of functional synaptic vesicles. Isolated synaptic vesicles can be used for transporter kinetics studies, synaptic vesicle content analysis and immuno-labeling of specific synaptic vesicle proteins, etc. Here I describe a fast and reliable isolation procedure to allow researchers to isolate a large amount, as well as physiologically functional synaptic vesicles, by following the subsequent order of cryogrinding, gradient ultracentrifugation, and size exclusion liquid chromatography. This process enriches over 90% of the synaptic vesicle population, with low contamination of Golgi or endoplasmic reticulum vesicles.

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