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[Expression and purification of human apolipoprotein M].

互补DNA 分子生物学 重组DNA 生物 紫胶操纵子 基因 GenBank公司 琼脂糖凝胶电泳 质粒 分子克隆 载脂蛋白B 克隆(编程) 遗传学 生物化学 计算机科学 程序设计语言 胆固醇
作者
Min Hu,Shui‐Ping Zhao,Tao Zhang,Yi Pan,Dan Xiong
出处
期刊:PubMed [National Institutes of Health]
卷期号:33 (1): 63-7
链接
标识
摘要

To express and purify the extra cellular full-length human apolipoprotein M(ApoM).The ApoM gene fragment was amplified from the human liver cDNA library by PCR. The resulting product was cloned into pGEXT vector and sequenced. Then the confirmed canstatin cDNA was cloned into plasmid E.coli JM109 and then transformed into E.coli DL21(DE3) where it was induced to express protein by IPTG.The ApoM gene was cloned by PCR and a 560 bp DNA fragment was shown on the agarose electrophoresis. The cloned gene was sequenced and demonstrated to have the same sequence as that of human ApoM gene in GenBank. Then ApoM cDNA gene fragment was induced by IPTG, and a 24 kD recombinant ApoM protein was tested on SDS-PAGE.Human ApoM gene is successfully cloned and its recombinant proteins are expressed.

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