分泌癌胚抗原肿瘤靶向性Cu,Zn—SOD的基因克隆及表达

将Cu,Zn-SOD与抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因(ScFv gene)融合，重组到含T7启动子的表达载体pET-22b(+)中，构建表达质粒pETSOD-ScFv，并转化大肠杆菌BL21(DE3)，进行高效表达，表达物占菌体可溶性总蛋白的18%。SDS-PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物相对分子质量为41kD，与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为分泌型表达，有利于纯化。RIA测定表明表达产物能特异性地与抗原CEA结合，邻苯三酚法测定也表明表达产物具有SOD酶的活性，该融合蛋白为分泌CEA肿瘤的靶向性治疗及放疗、化疗后的恢复提供新的途径。