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其它 | 一种土壤中噬菌体提取富集的方法,首先将鲜土以一定比例与柠檬酸钾缓冲液混合,放置于低温孵化一段时间,然后提取液将通过超声震荡处理从土壤颗粒中提取土壤噬菌体。土壤悬浊液经多次离心操作后取得上清液,经灭菌滤膜依次过滤除菌后,使用切向流过滤/超滤技术缩小滤液体积,进行噬菌体富集。使用聚乙二醇沉淀的方式回收噬菌体,低温放置过夜,第二天经离心、TE缓冲液溶解后再次过滤膜除菌,使用核酸酶消化样品中的杂质DNA和RNA。最终得到的浓缩液可以进行后续DNA提取及样品固定等操作。 |
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