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重组质粒构建:单酶切连接使用的重组试剂盒??
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1476
4
SherWei
来自
贵州
,
发表于:2026-01-19 17:10:35
本课题组一直使用的双酶切基因和质粒,然后利用T4连接酶进行重组质粒的构建。听说可以单酶切使用重组试剂盒进行连接,有研友知道的吗?
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4楼
傻傻的咖啡豆
2026-01-23 11:23:25
发布自
上海
,
科研民工
:
单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
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SherWei
:
嗯嗯,是的,但是现在我购买了一个新的质粒,推荐使用单酶切,所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒?之前一直没用过。
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这种试剂盒国内外各大厂家基本都有,碧云天 诺唯赞 Takara NEB都有同源重组/infusion克隆试剂盒,买个便宜试试,也不贵
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板凳
科研民工
6
2026-01-19 17:29:49
发布自
安徽
,
科研民工
:
单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
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SherWei
:
嗯嗯,是的,但是现在我购买了一个新的质粒,推荐使用单酶切,所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒?之前一直没用过。
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酶切后重组的方法也可以,效率比T4要高,买一支重组酶就可以了
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椅子
SherWei
(楼主)
2026-01-19 17:20:08
发布自
贵州
,
科研民工
:
单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
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嗯嗯,是的,但是现在我购买了一个新的质粒,推荐使用单酶切,所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒?之前一直没用过。
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沙发
科研民工
6
2026-01-19 17:18:44
发布自
安徽
,
单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
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