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重组质粒构建：单酶切连接使用的重组试剂盒？？

综合讨论 3377 4
SherWei
SherWei 3 来自贵州， 发表于：2026-01-19 17:10:35

本课题组一直使用的双酶切基因和质粒，然后利用T4连接酶进行重组质粒的构建。听说可以单酶切使用重组试剂盒进行连接，有研友知道的吗？

本帖完毕
回帖
  • 傻傻的咖啡豆
    4楼
    傻傻的咖啡豆 1 2026-01-23 11:23:25 发布自上海，
    科研民工： 单酶切双酶切均可，粘性末端比平末端的效果好
    赞 踩 回复
    SherWei： 嗯嗯，是的，但是现在我购买了一个新的质粒，推荐使用单酶切，所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒？之前一直没用过。
    赞 踩 回复
    这种试剂盒国内外各大厂家基本都有，碧云天 诺唯赞 Takara NEB都有同源重组/infusion克隆试剂盒，买个便宜试试，也不贵
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  • 科研民工
    板凳
    科研民工 2026-01-19 17:29:49 发布自安徽，
    科研民工： 单酶切双酶切均可，粘性末端比平末端的效果好
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    SherWei： 嗯嗯，是的，但是现在我购买了一个新的质粒，推荐使用单酶切，所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒？之前一直没用过。
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    酶切后重组的方法也可以，效率比T4要高，买一支重组酶就可以了
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  • SherWei
    椅子
    SherWei 3 (楼主) 2026-01-19 17:20:08 发布自贵州，
    科研民工： 单酶切双酶切均可，粘性末端比平末端的效果好
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    嗯嗯，是的，但是现在我购买了一个新的质粒，推荐使用单酶切，所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒？之前一直没用过。
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  • 科研民工
    沙发
    科研民工 2026-01-19 17:18:44 发布自安徽，
    单酶切双酶切均可，粘性末端比平末端的效果好
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