重组质粒构建:单酶切连接使用的重组试剂盒??

综合讨论 1476 4
SherWei
SherWei 来自贵州 发表于:2026-01-19 17:10:35

本课题组一直使用的双酶切基因和质粒,然后利用T4连接酶进行重组质粒的构建。听说可以单酶切使用重组试剂盒进行连接,有研友知道的吗?


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回帖
  • 傻傻的咖啡豆
    4楼
    傻傻的咖啡豆 2026-01-23 11:23:25 发布自上海
    科研民工单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
    SherWei嗯嗯,是的,但是现在我购买了一个新的质粒,推荐使用单酶切,所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒?之前一直没用过。
    这种试剂盒国内外各大厂家基本都有,碧云天 诺唯赞 Takara NEB都有同源重组/infusion克隆试剂盒,买个便宜试试,也不贵
  • 科研民工
    板凳
    科研民工 6 2026-01-19 17:29:49 发布自安徽
    科研民工单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
    SherWei嗯嗯,是的,但是现在我购买了一个新的质粒,推荐使用单酶切,所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒?之前一直没用过。
    酶切后重组的方法也可以,效率比T4要高,买一支重组酶就可以了
  • SherWei
    椅子
    SherWei (楼主) 2026-01-19 17:20:08 发布自贵州
    科研民工单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
    嗯嗯,是的,但是现在我购买了一个新的质粒,推荐使用单酶切,所以我想咨询一下单酶切不用T4连接酶了之后换成什么重组试剂盒?之前一直没用过。
  • 科研民工
    沙发
    科研民工 6 2026-01-19 17:18:44 发布自安徽
    单酶切双酶切均可,粘性末端比平末端的效果好
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