Analysis of Integrin Signaling by Fluorescence Resonance Energy Transfer

费斯特共振能量转移 整合素 生物传感器 细胞生物学 信号转导 生物 化学 生物物理学 纳米技术 荧光 生物化学 受体 材料科学 物理 量子力学
作者
Yingxiao Wang,Shu Chien
出处
期刊:Methods in Enzymology [Academic Press]
卷期号:: 177-201 被引量:14
标识
DOI:10.1016/s0076-6879(07)26009-4
摘要

Fluorescence resonance energy transfer (FRET) has been proven to be a powerful tool to visualize and quantify the signaling cascades in live cells with high spatiotemporal resolutions. Here we describe the development of the genetically encoded and FRET-based biosensors for imaging of integrin-related signaling cascades. The construction of a FRET biosensor for Src kinase, an important tyrosine kinase involved in integrin-related signaling pathways, is used as an example to illustrate the construction procedure and the pitfalls involved. The design strategies and considerations on improvements of sensitivity and specificity are also discussed. The FRET-based biosensors provide a complementary approach to traditional biochemical assays for the analysis of the functions of integrins and their associated signaling molecules. The dynamic and subcellular visualization enabled by FRET can shed new light on the molecular mechanisms regulating integrin signaling and advance our knowledge in the understanding of integrin-related pathophysiological processes.
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