CRISPR-mediated live imaging of genome editing and transcription

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作者
Haifeng Wang,Muneaki Nakamura,Timothy R. Abbott,Dehua Zhao,Kaiwen Luo,Cordelia Yu,Cindy M. Nguyen,Albert Lo,Timothy Daley,Marie La Russa,Yanxia Liu,Lei S. Qi
出处
期刊:Science [American Association for the Advancement of Science]
卷期号:365 (6459): 1301-1305 被引量:236
标识
DOI:10.1126/science.aax7852
摘要

Tracking nucleic acids in living cells Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful molecular technique for detecting nucleic acids in cells. However, it requires cell fixation and denaturation. Wang et al. found that CRISPR-Cas9 protects guide RNAs from degradation in cells only when bound to target DNA. Taking advantage of this target-dependent stability switch, they developed a labeling technique, named CRISPR LiveFISH, to detect DNA and RNA using fluorophore-conjugated guide RNAs with Cas9 and Cas13, respectively. CRISPR LiveFISH improves the signal-to-noise ratio, is compatible with living cells, and allows tracking real-time dynamics of genome editing, chromosome translocation, and transcription. Science , this issue p. 1301
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