곰팡이의 Cytosine Deaminase에 관한 연구

Cytosine deaminase는 세균과 효모에서는 연구되었으나 비교적 진화가 진행된 생물인 곰팡이에서는 전혀 연구되어 있지 않았다. 곰팡이 중 특히. 효소 활성이 높은 Aspergillus fumigatus로부터 cytosine deaminase를 추출하여 부분 정제한 효소의 특성을 규명하였다. 곰팡이의 cytosine deaminase는 pH 5.5-8.0에서 비교적 안정하나, 열 안정성은 아주 낮은 효소였으며 pH 7.0과 30-35 $^{\circ}C$ 에서 반응 최적 조건을 나타내며 활성화 에너지 값(Ea)는 13,240ca1/mol 이었다. 본 효소는 cytosine 뿐만 아니라 5-methylcytosine과 5-fluorocytosine을 기질로 이용하며 cytosine에 대한 km값은 1.53mM이며, 분자량은 32,000 이었다. Cytosine deaminase의 효소 활성은 Hg $^{2+}$ , Pb $^{2+}$ , Cd $^{2+}$ , Fe $^{2+}$ 에 의하여 저해되며 1mM ATP와 UTP에 의해서도 저해되었다. 더우기 본 효소는 o-phenanthroline, p-chloromercuribenzoate에 의하여 저해되기도 했다. 【Cytosine deaminase was partialy purified about 10 fold from the ceil-free extract of Aspergillus fumigatus. The partialy purified enzyme was relatively stable in a pH 5.5 to 8.0, but thermo-unstable. The enzyme activity was found in a pH optimum of 7.0 and temperature optimum of 30 to 35 $^{\circ}C$ . The activation energy calculated to be 13,240 cal/mol. The apparent Michaelis constants Km for cytosine was found to be 1.53 mM and the molecular weight was determined to be approximately 32,000. The enzyme was strongly inhibited by 0.1 mM of Hg $^^{2+}$ , Pb $^{2+}$ , Cd $^{2+}$ and Fe $^{2+}$ , furthermore inhibited by 1mM of ATP, UTP, o-phenanthroline and p-chloromercuribenzoate.】