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S/MAR Element Facilitates Episomal Long-Term Persistence of Adeno-Associated Virus Vector Genomes in Proliferating Cells

生物 支架/基质附着区域 载体(分子生物学) 腺相关病毒 转基因 基因组 质粒 病毒学 病毒 人口 基因 分子生物学 遗传学 基因表达 重组DNA 染色质重塑 人口学 社会学
作者
Claudia Hagedorn,Maria Schnödt-Fuchs,Philip Boehme,Heba Abdelrazik,Hans J. Lipps,Hildegard Büning
出处
期刊:Human Gene Therapy [Mary Ann Liebert, Inc.]
卷期号:28 (12): 1169-1179 被引量:29
标识
DOI:10.1089/hum.2017.025
摘要

Adeno-associated virus (AAV) vectors are one of the most frequently applied gene transfer systems in research and human clinical trials. Since AAV vectors do not possess an integrase activity, application is restricted to terminally differentiated tissues if transgene expression is required long term. To overcome this limitation and to generate AAV vectors that persist episomally in dividing cells, AAV vector genomes were equipped with a scaffold/matrix attachment region (S/MAR). After a mild antibiotic selection, cells transduced with AAV-S/MAR established colonies that maintained long-term transgene expression (>50 population doublings) from replicating AAV vector episomes in the absence of further selection. Unexpectedly, with a lesser but still significant efficiency, the control vector (AAV-ΔS/MAR), a standard single-stranded AAV vector, also established stable transgene-expressing colonies, most of which were maintained as replicating episomes rather than integrated vector genomes. Thus, based on the result in HeLa cells, it is concluded that AAV vector genomes per se possess the ability to establish episomal maintenance in proliferating cells, a feature that can be enhanced by incorporation of a foreign genomic element such as an S/MAR element.
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