Einfluss epithelialer Proteinmengen des EGFr in muriner und humaner Colitis auf intrazelluläre Signalkaskaden

Einleitung: Vorarbeiten haben gezeigt, dass Interferon-gamma (IFN-γ) die Menge an epidermalem Wachstumsfaktor (EGFr) in intestinalen Kolonepithelzellen (IEC) erhöht. Gleichzeitig war der Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3-K)-Signalweg im Vergleich zum Mitogen aktivierten Proteinkinasen (MAPK)-Signalweg stärker aktiviert. Ziele: Wir untersuchen, ob die Mengen und Aktivierung dieser Signalmoleküle bei der murinen Kolitis und in isolierten IEC von Patienten mit Morbus Crohn (MC, n=8), oder nicht entzündlichen (n=7) und entzündlichen Kontrollen (Sigmadivertikulitis, SD, n=3) verändert sind. Methodik: Eine akute DSS-Kolitis wurde bei C57/B6-Mäusen induziert. Mdr1a–/– Mäuse entwickelten spontan eine Kolitis. Darmmukosagewebe wurde lysiert und im Western Blot analysiert. Humane IEC wurden aus chirurgischen Resektaten isoliert. Lamina propria mononukleäre Zellen (LPMC) wurden mittels Ficoll™-Gradient isoliert und kuliviert (±anti-CD3; 24h). Die Überstände wurden auf die IFN-γ-Menge mittels ELISA untersucht. Ergebnisse: Kolongewebe von C57/B6- und Mdr1a–/– Mäusen mit Kolitis zeigten einen signifikant erhöhten EGFr-Gehalt im Vergleich zu Kontrollen (p<0,05; n=5/Gruppe). Die basale IFN-γ Sekretion von unstimulierten LPMCs war bei MC signifikant erhöht im Vergleich zu nicht-entzündlichen Kontrollen (7,4±0,6 pg/ml vs. 4,8±1,1 pg/ml; p<0,05; n=4 und n=7). Es war auch ein Trend zu erhöhter IFN-γ Produktion von anti-CD3 stimulierten LPMCs bei MC zu verzeichnen (880±84 pg/ml vs. 732±82 pg/ml; p<0,05; n=4 und n=6). Interessanterweise war EGFr in IEC von Patienten mit MC nicht in erhöhten Mengen nachweisbar, aber leicht erhöht bei Patienten mit SD. Schlussfolgerung: Erhöhtes IFN-γ in der entzündeten Kolonmukosa könnte für eine veränderte Signaltransdukion, ausgehend vom EGFr, verantwortlich sein. Obwohl EGFr in Geweben von Mäusen mit Kolitis erhöht war, traf dies auf Patienten mit MC nicht zu. Weitere Untersuchungen sind notwendig, um zu untersuchen, ob die Krankheitsaktivität oder immunsuppressive Therapie Einfluss auf mukosale EGFr-Spiegel bei MC hat.