Desenvolvimento e avaliação de nanocarreadores catiônicos bioadesivos como plataforma para localização de piplartina na mama visando o tratamento tumoral.

O câncer de mama é uma das principais causas de morte entre as mulheres, representando cerca de 25% de novos casos anuais no Brasil e no mundo.Os carcinomas ductais in situ (DCIS) representam a forma mais comum de câncer de mama não invasivo.Considerando que os DCIS geralmente se iniciam nas células epiteliais que revestem os dutos, foram desenvolvidas neste estudo nanoemulsões (NE) bioadesivas e nanopartículas poliméricas (NP) termossensíveis a base de pNIPAM para administração intraductal do quimioterápico piplartina (piperlongumina).Para conferir propriedades bioadesivas, a NE foi modificada com quitosana (NE-Q) ou ácido hialurônico (NE-HA).O uso de fosfatidilcolina associado ao polissorbato 80 e glicerol como tensoativos permitiu a formação sistemas de 76,5 ± 1,2 nm.A inclusão de quitosana ou ácido hialurônico resultou em NEs com carga oposta, potencial bioadesivo in vitro semelhante e capacidade comparável de prolongar a retenção do marcador fluorescente Alexa flúor 647 no tecido mamário por 120 h in vivo comparado à solução e administração sistêmica do composto.Não foram observadas alterações histológicas.As nanopartículas de pNIPAM foram modificadas com o peptídeo SILY para ligação ao colágeno e direcionamento, e a piplartina foi coencapsulada com um peptídeo inibidor de MK2 (YARA) para potencialização da citotoxicidade.As NPs apresentaram diâmetro médio de 361,5 ± 04,6 nm, sendo observada diminuição no raio hidrodinâmico em temperaturas acima da temperatura de solução crítica.Sua administração intraductal in vivo prolongou a retenção da rodamina no tecido mamário por 120 h sem promover alterações histológicas.A piplartina em solução apresentou IC50 de 10,1 -11,3 M nas linhagens de câncer de mama T47-D e MCF-7.Sua incorporação em NE-HA e NP resultou em aumento da citotoxicidade e redução do IC50 em até 3,6 vezes para NE-HA e 1,6 vezes para NP.Uma redução adicional (~4,0 vezes) foi observada com a combinação de piplartina com YARA em NP.Resultados ainda mais pronunciados foram observados em modelos 3D, representados por esferoides de T47-D ou MCF7, com redução do IC50 em até 6,6 e 4,6 vezes utilizando NE-HA e NP, respectivamente.Consistente com os resultados em monocamadas, a associação de piplartina e YARA em NP reduziu ainda mais o IC50 (até 15 vezes) do fármaco em esferoides.O aumento da citotoxicidade medida pelos nanocarreadores pode decorrer de penetração mais eficiente, como observado por meio da visualização da penetração da rodamina B em culturas 2D e 3D.Em modelo pré-clínico de câncer de mama, tumores palpáveis desenvolveram-se em 77,7% dos animais no grupo não tratado induzido (2,5 ± 1,6 tumores por animal).Por outro lado, semelhante ao grupo não induzido, não foram observados tumores palpáveis no grupo tratado com NE-HA, enquanto que o tratamento com NP reduziu em 18 vezes a incidência desses tumores.Esses resultados foram confirmados por meio de análises histológicas, em que alterações histológicas compatíveis com DCIS foram observadas no grupo induzido e não tratado, enquanto os grupos tratados com NE-HA e NP apresentaram um padrão de organização tecidual mais semelhante ao grupo controle não induzido.Em conjunto, esses resultados evidenciam as vantagens da nanoencapsulação da piplartina, inclusive em associação com inibidor de MK2, e a potencial aplicabilidade dos nanocarreadores desenvolvidos para administração intraductal e tratamento de DCIS e lesões mamárias de baixo risco.