Clone expression and identification of the gene SLT-IIeA in E. coli

融合蛋白 分子生物学 重组DNA 基因 生物 质粒 紫胶操纵子 谷胱甘肽S-转移酶 融合基因 表达式向量 基因表达 免疫印迹 嵌合基因 遗传学 谷胱甘肽 生物化学
作者
Yan Zhenlong,Lei Chen,Jiang LianLian,Cheng DaRong,Jing Xu,Guowei Dong,Junbao Li
摘要

The SLT-IIeA gene was cut off from the recombined pSLT-IIeA which contained the SLT-IIeA gene and transferred into the plasmid vector pGEX-6p-1. The gene was genetically inserted at the downstream of the 3'terminus of the gene coding for enzyme glutathione S-transferase, which served as a carrier in this expression system. Recombinant expression plasmid ppSLT-IIeA was constructed, and transferred into E.coli BL21.After induced with IPTG, FedA was expressed as fusion protein linked with the GST. The fusion protein was designated as GST-SLT-IIeA. The res μLts of SDS-PAGE and Western-blot assay demonstrated that the protein expressed by the recombinant plasmid ppSLT-IIeA can specifically response to monoclonal antibody against SLT-IIeA.This indicated that the expected protein was successf μLly obtained.The above reserch is the first report on expression of SLT-IIeA of ED, and will lay foundation to the prevention of ED by gene engineer vaccines.
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