N-Myristoyl transferase-mediated protein labelling in vivo

生物正交化学 标签 化学 蛋白质标签 点击化学 转移酶 生物化学 叠氮化物 体内 基质(水族馆) 体外 组合化学 肉豆蔻酰化 融合蛋白 重组DNA 有机化学 生物 生态学 生物技术 基因
作者
William P. Heal,Sasala R. Wickramasinghe,Robin J. Leatherbarrow,Edward W. Tate
出处
期刊:Organic and Biomolecular Chemistry [The Royal Society of Chemistry]
卷期号:6 (13): 2308-2308 被引量:134
标识
DOI:10.1039/b803258k
摘要

N-Myristoyl transferase-mediated labelling using a substrate modified with an azide or alkyne tag is described as an efficient and site-selective method for the introduction of a bioorthogonal tag at the N-terminus of a recombinant protein. The procedure may be performed in vitro, or in a single over-expression/tagging step in vivo in bacteria; tagged proteins may then be captured using Staudinger-Bertozzi or 'click' chemistry protocols to introduce a secondary label for downstream analysis. The straightforward synthesis of the chemical and molecular biological tools described should enable their use in a wide range of N-terminal labelling applications.

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