Analysis of Yeast Sporulation Efficiency, Spore Viability, and Meiotic Recombination on Solid Medium

四分体 减数分裂 孢子发生 孢子 同源重组 遗传学 生物 倍性 遗传重组 前期 染色体 酿酒酵母 染色体交叉 同源染色体 基因 重组 微生物学
作者
G. Valentin Börner,S. Rita
出处
期刊:CSH Protocols [Cold Spring Harbor Laboratory Press]
卷期号:2015 (11): pdb.prot085027-pdb.prot085027 被引量:4
标识
DOI:10.1101/pdb.prot085027
摘要

Under conditions of nutrient deprivation, yeast cells initiate a differentiation program in which meiosis is induced and spores are formed. During meiosis, one round of genome duplication is followed by two rounds of chromosome segregation (meiosis I and meiosis II) to generate four haploid nuclei. Meiotic recombination occurs during prophase I. During sporogenesis, each nucleus becomes surrounded by an individual spore wall, and all four haploid spores become contained as a tetrad within an ascus. Important insights into the meiotic function(s) of a gene of interest can be gained by observing the effects of gene mutations on spore viability and viability patterns among tetrads. Moreover, recombination frequencies among viable spores can reveal potential involvement of the gene during meiotic exchange between homologous chromosomes. Here, we describe methods for inducing spore formation on solid medium, determining spore viability, and measuring, via tetrad analysis, frequencies of crossing over and gene conversion as indicators of meiotic chromosome exchange.
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