Native RNA Immunoprecipitation (RIP) for Precise Detection and Quantification of Protein-Interacting RNA

免疫沉淀 核糖核酸 分子生物学 RNA提取 RNA结合蛋白 化学 生物 生物化学 基因
作者
Mai Baker,Rami Khosravi,Maayan Salton
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:2666: 107-114 被引量:2
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-3191-1_8
摘要

Proteins with either RNA or DNA-binding motifs were shown to bind RNA. Immunoprecipitation of such proteins using antibodies and identification of the RNA-binding molecules is called RNA immunoprecipitation (RIP). The RNA precipitated with the studied protein can be detected by real-time polymerase chain reaction (PCR), microarray or sequencing. Here, we detail a method for native immunoprecipitation, without cross-linking, to isolate protein-RNA complexes followed by subsequent extraction and quantification of the co-purified RNA.
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