Control of germinal vesicle breakdown in bovine x murine hybrid oocytes

― Bovine oocytes cultured in control medium or in medium containing dibutyrylcyclic adenosine monophosphate (dbcAMP) or an inhibitor of cyclic nucleotide phosphodiesterase (3isobutyl-1-methylxanthine, IBMX) undergo germinal vesicle breakdown (GVBD). On the other hand, mouse oocytes remain arrested at the germinal vesicle (GV) stage when dbcAMP or IBMX is present. When 1 bovine GV stage oocyte is fused to 1 GV stage mouse oocyte, dissolution of both species' GV occurred in dbcAMP-supplemented medium. Only when 4 to 5 GV stage mouse oo- cytes are fused to 1 GV stage bovine oocyte, and these giant cells are cultured in dbcAMP-medium, is maturation arrested with only GVs present in the cytoplasm. The inhibitory effect is more evident in IBMX-supplemented medium. Here nearly 50% of the fused cells exhibit GVs, both mouse and bovine, when 1 cattle GV oocyte is fused to 1 mouse GV oocyte and the fused cells are cultured for 24 h. Moreover, nearly all GVs are well preserved after fusion of 1 bovine oocyte to 2 or more mouse oocytes. When these hybrid cells after 24 h culture in IBMX are then washed and cultured in control medium for a further 24 h, GVBD occurred in all cells. We are of the opinion that this novel approach (ie mixing of sensitive and non-sensitive cytoplasm) may in the future better explain the mechanisms involved in the regulation of mammalian oocyte maturation. meiosis / mammals / oocyte / cell fusion Rsum ― Contrle de la rupture de la vsicule germinative dans des ovocytes hybrides (vache x souris). Des ovocytes de vache cultivs dans un milieu tmoin ou dans un milieu conte- nant du dibutyryl adnosine monophosphate cyclique (dbcAMP) ou un inhibiteur de la phosphodiestrase (3-isobutyl-1-mthylxanthine, IBMX) subissent la rupture de la vsicule germinative. Au contraire, des ovocytes de souris restent au stade de la vsicule germinative (VG) en prsence de dbcAMP ou d'IBMX. Aprs fusion d'un ovocyte de vache et d'un ovocyte de souris, la rupture des VG se produit dans le milieu supplment en dbcAMP. C'est seulement quand 4 ou 5 ovocytes de souris sont fusionns avec un ovocyte de vache que la maturation est bloque au stade de la VG en prsence de dbcAMP. L'effet inhibiteur de l'IBMX est suprieur : presque 50% des cellules restent au stade de la VG, aprs fusion d'un ovocyte de vache avec un ovocyte de souris et plus de 90% aprs fusion d'un ovocyte de vache avec 2 ovocytes de souris. Quand ces ovocytes hybrides culti- vs 24 h avec IBMX sont lavs et cultivs dans le milieu tmoin pendant 24 h, la rupture de la VG se produit dans tous les ovocytes. Cette nouvelle approche (mlange de cytoplasme sensible ou non) devrait tre un outil pour tudier les mcanismes de la rgulation de la maturation des ovocytes de Mammifres. miose / Mammifres / ovocytes / fusion