Analysis of depression-like behavioral performances of mouse models of vitiligo

摘要： 【摘要】 目的 观察分析白癜风模型小鼠抑郁样行为学表现。方法 对15只约9周龄C57BL/6雌性小鼠进行白癜风动物模型的构建，通过肉眼观察以及第23天采用表皮全层免疫荧光染色检测鼠尾组织以判断白癜风小鼠模型构建成功与否；在第8天（成模前）和第21天（成模后早期）采用高架十字迷宫实验和旷场实验检测小鼠行为学表现，包括进入开臂次数、开臂停留时间百分比、中央区域停留时间百分比和总行进距离，以评估白癜风小鼠模型是否出现抑郁样行为。为进一步明确白癜风造模对小鼠抑郁样状态影响的严重程度，将20只C57BL/6雌性小鼠平均分为单纯白癜风造模组和白癜风造模 + 慢性束缚应激组，其中白癜风造模 + 慢性束缚应激组小鼠在第9天开始进行慢性束缚应激，即置于离心管中，每天束缚约6 h，持续28 d；两组均在白癜风造模后第7、22、29和38天采用高架十字迷宫实验和旷场实验检测小鼠上述行为学指标。单组前后2次重复测量数据的比较采用配对t检验，多个时间点重复测量资料的比较采用两因素重复测量的方差分析。结果 肉眼观察造模小鼠尾部皮肤逐渐出现境界清楚的白斑，与白癜风患者的临床表现相似，同时第23天鼠尾表皮全层免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜下观察，见明显的CD8+ T细胞浸润，且Melan-A阳性的表皮黑素细胞数量减少，具有典型的白癜风病理特征，提示白癜风小鼠模型构建成功，第23天成功建模12只。高架十字迷宫实验显示，这12只白癜风模型小鼠第21天进入开臂次数［（2.33 ± 1.78）次］、开臂停留时间百分比（5.01% ± 5.27%）均明显低于第8天［（10.75 ± 2.30）次，29.20% ± 12.48%；t = 9.63、6.36，均P < 0.001］；旷场实验显示，第21天在中央区域停留时间百分比（2.31% ± 1.53%）和总行进距离［（2 518.31 ± 528.38） cm］明显低于第8天［4.47% ± 2.65%、（3 533.45 ± 465.47） cm；t = 2.40、5.47，P = 0.036、 < 0.001］。慢性束缚应激实验中，第23天检测造模成功小鼠共14只，单纯白癜风造模组5只和白癜风造模 + 慢性束缚应激组9只，在第7、22、29和38天进入开臂次数、开臂停留时间百分比、中央区域停留时间百分比、总行进距离的组间差异均无统计学意义（F = 0.21、0.20、0.46、2.35，P = 0.889、0.893、0.719、0.134），除行进距离（F = 1.03，P = 0.422）外，其余指标随时间的变化有统计学意义（F = 19.54、24.68、15.53 ，均P < 0.001）。结论 白癜风小鼠在成模后早期即出现抑郁样行为，且在此基础上施加慢性束缚应激无法使其抑郁程度进一步加深。