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Innate Reverse Transcriptase Activity of DNA Polymerase for Isothermal RNA Direct Detection

DNA 底漆(化妆品) RNA聚合酶 实时聚合酶链反应 RNA聚合酶Ⅱ 逆转录聚合酶链式反应 核糖核酸酶H 聚合酶链反应 核酸 抄写(语言学) 生物化学 核苷酸转移酶
作者
Chao Shi,Xiaotong Shen,Shuyan Niu,Cuiping Ma
出处
期刊:Journal of the American Chemical Society [American Chemical Society]
卷期号:137 (43): 13804-13806 被引量:74
标识
DOI:10.1021/jacs.5b08144
摘要

RNA detection has become one of the most robust parts in molecular biology, medical diagnostics and drug discovery. Conventional RNA detection methods involve an extra reverse transcription step, which limits their further application for RNA rapid detection. We herein report a novel finding that Bst and Klenow DNA polymerases possess innate reverse transcriptase activities, so that the reverse transcription step and next amplification reaction can be combined to one step in isothermal RNA detection. We have demonstrated that Bst and Klenow DNA polymerases could be successfully used to reverse transcribe RNA within 125-nt length by real time RT-PCR and polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). Our findings will spur the development of a myriad of simple and easy to use RNA detection technologies for isothermal RNA direct detection. This will just meet the future needs of bioanalysis and clinical diagnosis to RNA rapid detection in POC settings and inspection and quarantine.
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