Expression Profiles of Immune-Related Genes and Apoptosis Study of Avian Intraepithelial-Natural Killer Cells in Chickens Inoculated with Vaccine Strain of Newcastle Disease Virus (NDV) and Challenged with Virulent NDV

Perfiles de expresión de genes relacionados con la inmunidad y estudio de apoptosis de células asesinas naturales intraepiteliales aviares en pollos inoculados con la cepa vacunal del virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) y desafiados con de Newcastle virulento. A pesar de la información disponible sobre el papel de las células asesinas naturales (NK) en varias infecciones virales, se conoce poco acerca de las interacciones entre las células NK intraepiteliales de pollo (IEL-NK) y el virus de la enfermedad de Newcastle (NDV). En este estudio, investigamos estas interacciones luego de la inoculación de pollos con la cepa vacunal LaSota y con el desafío posterior con los genotipo VII (GVII) y VIII (GVIII) velogénico de NDV (vNDV), mediante la cuantificación de la apoptosis de las células IEL-NK y los perfiles de expresión de sus receptores de superficie. Los pollos libres de patógenos específicos se dividieron aleatoriamente en seis grupos, de la siguiente manera: un grupo de control no infectado, un grupo infectado con LaSota, dos grupos cada uno infectado con GVII o GVIII, y dos grupos inoculados con LaSota y desafiados con ya sea el genotipo GVII (LaSota-genotipo VII [LSGVII]) o con el genotipo GVIII (LaSota-genotipo VIII [LSGVIII]). Se aislaron células NK intraepiteliales de pollo de las asas duodenales y se caracterizaron las células CD3-. La inmunofenotipificación y el análisis de apoptosis de las células NK CD3-/CD25+/CD45+IEL se realizaron utilizando citometría de flujo. Además, se realizó un estudio de expresión de genes mediante PCR cuantitativa en tiempo real. Los datos se analizaron utilizando un análisis de varianza de dos vías. Los resultados mostraron que el virus de Newcastle genotipos GVII o GVIII causaron apoptosis de células NK intraepiteliales; sin embargo, después de por los tratamientos LaSota-genotipo VII o LaSota-genotipo VIII, el efecto de del virus virulento de Newcastle GVII y GVIII para provocar una reducción en la población de células NK intraepiteliales viables se redujo significativamente. Además, los perfiles de expresión de los receptores activadores CD69, NK-lisina e IFN-γ generalmente aumentaron en pollos inoculados con los tratamientos LaSota-genotipo VII o LaSota-genotipo VIII. Por el contrario, B-NK, que es un receptor inhibidor, se reguló a la baja en estos grupos de tratamiento. Sin embargo, en los grupos expuestos a los virus de Newcastle genotipos GVII y GVIII, el gene B-NK estaba regulado al alza, mientras que los otros receptores generalmente estaban regulados a la baja. Los hallazgos de este estudio mostraron que la cepa vacunal LaSota puede prevenir la apoptosis y causar una regulación al alza de los receptores activadores de las células NK intraepiteliales de pollo en entornos expuestos al virus velogénico.