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微生物定殖用qPCR怎么检测

综合讨论 90005 3
啥东西啥
啥东西啥 来自福建， 发表于：2025-01-07 22:09:54

检测微生物是否定殖于植物内应该怎么做？

查了资料，没查明白，救救孩子吧

说微生物定殖可以用qPCR怎么检测，具体是怎么操作的呀？怎么计算的？

本帖完毕
回帖
  • 坦率的平安
    板凳
    坦率的平安 2025-03-19 09:01:21 发布自上海，
    坦率的平安： 先用已知含量的细菌（微生物）抽提RNA、逆转录、qPCR，做一个标曲。然后从你目标组织再抽提RNA、逆转录、qPCR，跟标曲对照计算就可以了
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    啥东西啥： 你好，我想问一下，已知含量的菌，以细菌为例，就是我设置不同的OD值，来抽提RNA、逆转录、qPCR，那怎么生成标曲？使用什么公式？以及qPCR的引物选用什么序列进行引物设计呢？求解答，谢谢~
    赞 踩 回复
    也可以是一个浓度的菌，最后的cDNA梯度稀释，然后qPCR，用ct值和od生成标曲，就是简单的线性拟合。qPCR引物就选择细菌的管家基因，也就是普通做qPCR时的内参。
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  • 啥东西啥
    椅子
    啥东西啥 (楼主) 2025-01-17 15:12:58 发布自福建，
    坦率的平安： 先用已知含量的细菌（微生物）抽提RNA、逆转录、qPCR，做一个标曲。然后从你目标组织再抽提RNA、逆转录、qPCR，跟标曲对照计算就可以了
    赞 踩 回复
    你好，我想问一下，已知含量的菌，以细菌为例，就是我设置不同的OD值，来抽提RNA、逆转录、qPCR，那怎么生成标曲？使用什么公式？以及qPCR的引物选用什么序列进行引物设计呢？求解答，谢谢~
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  • 坦率的平安
    沙发
    坦率的平安 2025-01-08 10:23:43 发布自上海，
    先用已知含量的细菌（微生物）抽提RNA、逆转录、qPCR，做一个标曲。然后从你目标组织再抽提RNA、逆转录、qPCR，跟标曲对照计算就可以了
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