新手上路，请教各位师兄师姐一些问题：
1.关于冰冻切片组织固定与否的困惑：
冰冻切片是否需要前固定或者后固定？
（1）一块组织想做冰冻切片的话，这个组织需要事先用4%的PFA进行固定吗？如果需要的话应该固定多久？
（2）如果组织事先没有进行前固定，那么做完冰冻切片以后，组织切片还需要进行4%PFA的固定吗？如果需要的话，需要固定多久？
（3）如果需要固定，那么做免疫荧光的时候需要进行抗原修复吗？
2.冰冻切片的组织如何保存？
（1）做好的冰冻切片，如果无法当天及时进行免疫荧光的染色，那么切片应该保存在多少摄氏度？ 4、-20、-80？
（2）如果取材的新鲜组织无法当天做冰冻切片，那么取材的组织应该进行怎么样的保存处理？我看网上大部分是OCT包埋以后进行液氮速冻，速冻以后放入-80℃进行保存，但是也有人说不需要OCT包埋处理，直接扔到-80度冰箱。
3.冰冻切片做免疫荧光前为什么需要烘干？
烘干的目的是什么？烘干是为了防止脱片吗？
4.关于冰冻组织切片在免疫荧光过程中组织发生部分脱落的问题
冰冻切片在免疫荧光的操作过程中，肉眼可见的组织切片发生了一部分的脱落和破碎，好好的组织中间出现了空洞，请问是什么原因呢？应该怎么做才能避免这种情况的发生呢？
谢谢回答！！！
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(2025-6-4)
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