A comparative study on rat models of psoriasis-like lesions induced by different cytokines combined with imiquimod

摘要: 【摘要】 目的 探讨白细胞介素(IL)23/Th17轴的相关细胞因子联合咪喹莫特诱导银屑病样皮炎大鼠模型的可行性。方法 将110只Wistar大鼠按体重相对均匀分为正常对照组、咪喹莫特单用组、咪喹莫特联用干扰素(IFN)α2a(18万、6万、2万IU/kg)组、咪喹莫特联用肿瘤坏死因子(TNF)α(4.5万、1.5万、0.5万IU/kg)组及咪喹莫特联用IL-2(9万、3万、1万IU/kg)组,每组10只。将大鼠背部中央区域(2 cm × 2 cm)的毛发脱去后,咪喹莫特单用组大鼠背部按照20 mg/cm2均匀涂抹5%咪喹莫特乳膏;咪喹莫特联用各细胞因子组大鼠背部按相同剂量涂抹5%咪喹莫特乳膏,并于涂抹15 min后,腹腔注射相应剂量细胞因子注射液,每日1次,连续10 d。其间每日对大鼠背部皮肤进行银屑病皮损面积与严重程度指数(PASI)评分。第10天麻醉后,收集血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清中IL-17A、TNF-α、IL-23、IFN-α及IL-1β水平;大鼠处死后,取部分皮损进行组织病理学观察并进行Baker评分,采用免疫组化法检测部分皮损中CD4、CD8的表达情况。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。方差不齐的数据,采用Kruskal-Wallis H检验。结果 造模后第3天开始,咪喹莫特单用组及联用各细胞因子组大鼠皮肤均出现红斑、鳞屑、表皮增厚等银屑病临床特征,且单用组PASI评分于第7天达峰,各联用组第6天达峰。第10天时,咪喹莫特单用及联用组皮肤组织病理学上均可见过度角化、角化不全、棘层肥厚、颗粒层变薄或消失等不同程度的银屑病病理特征。正常对照组、咪喹莫特单用及各联用组PASI评分、Baker评分差异均有统计学意义(H = 43.33、F = 42.15,均P < 0.001 )。咪喹莫特联用IFN-α2a(18万IU/kg)组及联用IL-2(9万IU/kg)组PASI评分(9.4 ± 1.1、8.8 ± 0.6)均高于咪喹莫特单用组(7.5 ± 1.1,P值分别为0.002、0.030);咪喹莫特联用IFN-α2a(18、6万IU/kg)组、联用TNF-α(4.5万IU/kg)及联用IL-2(9万IU/kg)组Baker评分均明显高于咪喹莫特单用组(均P < 0.05)。各组间血清中TNF-α、IL-17A、IL-1β及IL-23水平差异均有统计学意义(F = 128.97、F = 6.90、H = 27.45、H = 21.10,均P < 0.05):与咪喹莫特单用组相比,咪喹莫特联用IL-2(3万IU/kg)组IL-17A水平明显较高[(5.54 ± 1.78) pg/ml比(4.20 ± 1.14) pg/ml,P = 0.009],咪喹莫特联用IL-2(9万IU/kg)组IL-23水平亦明显较高[(37.89 ± 32.85) pg/ml比(8.56 ± 6.08) pg/ml,P = 0.036]。免疫组化显示,各组间皮损中CD4、CD8表达差异有统计学意义(F = 7.21、H = 18.32,P < 0.001),咪喹莫特联用IL-2(9万IU/kg)组皮损中CD4、CD8表达均明显高于咪喹莫特单用组(t = -2.46、-2.32,均P < 0.05)。结论 咪喹莫特联用IFN-α2a及IL-2能够促进大鼠银屑病样皮损的发生,加速银屑病的发展并延长模型维持时间。