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The development of a sensitive droplet digital PCR for quantitative detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus

猪繁殖与呼吸综合征病毒 数字聚合酶链反应 实时聚合酶链反应 生物 病毒 病毒学 线性 聚合酶链反应 基因 遗传学 量子力学 物理
作者
Qi Yang,Jun Xi,Xinxin Chen,Sihong Hu,Chen Nan,Songlin Qiao,Shaogui Wan,Dengke Bao
出处
期刊:International Journal of Biological Macromolecules [Elsevier BV]
卷期号:104 (Pt A): 1223-1228 被引量:31
标识
DOI:10.1016/j.ijbiomac.2017.06.115
摘要

Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) is an infectious disease, resulting in important economic losses in pig farming. Prompt detection of PRRS virus (PRRSV) in the field samples is important for effective PRRS control. Droplet digital PCR (ddPCR) is a novel PCR technology, which offers good precision and direct quantification without using calibration curves. In this study, we established a ddPCR system for the sensitive and accurate quantification of PRRSV. Specificity of the assay was determined by the failure of amplification of other relevant viruses. Quantitative linearity, sensitivity and accuracy of ddPCR were compared to those of real time PCR for PRRSV testing. Both methods showed a high degree of linearity (R2 = ∼1) and quantitative correlation, although ddPCR showed somewhat higher sensitivity than real time PCR. Collectively, our findings indicate that ddPCR might offer improved analytical sensitivity and specificity for PRRSV measurements.
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