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Mercury-containing preparations attenuate neutrophil extracellular trap formation in mice and humans through inhibiting the ERK1/2 pathway

中性粒细胞胞外陷阱 髓过氧化物酶 细胞外 流式细胞术 吞噬作用 细胞内 化学 活性氧 佛波 药理学 分子生物学 生物化学 炎症 微生物学 免疫学 生物 激酶 蛋白激酶C
作者
Huike Ma,Wentao Yao,Bing Peng,Xin Liu,Jia Chen,Yan Lin,Tingting Di,Ping Li,Xiujuan He
出处
期刊:Journal of Ethnopharmacology [Elsevier BV]
卷期号:321: 117421-117421 被引量:2
标识
DOI:10.1016/j.jep.2023.117421
摘要

Neutrophil extracellular trap (NET) formation plays a crucial role in wound healing disorders, including chronic skin ulcers and diabetic foot ulcers (DFUs). Over the years, traditional Chinese topical medications, such as Cinnabar (composed of HgS and soluble mercury salt) and hydrargyria oxydum rubrum (containing HgO and soluble mercury salt), have been utilized for treating these ailments. Nevertheless, the fundamental processes remain mostly ambiguous. This study sought to investigate the potential effects of topical mercury-containing preparations on the process of NET formation. Neutrophils isolated from healthy individuals and mouse models of type 1 and type 2 diabetes were cultured with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), both with and without the mercury-containing preparations (MCP). The formation of NETs was monitored using confocal and scanning electron microscopes. Immunofluorescence and fluorescent probes were employed to assess the levels of citrulline histone H3 (Cit-H3) and intracellular reactive oxygen species (ROS), respectively. The impact of MCP extracts on cytokine expression, peptidylarginine deiminase 4 (PAD4), and myeloperoxidase (MPO) was measured through Luminex and ELISA assays. Phagocytosis of human neutrophils was analyzed using Flow Cytometry. Finally, the phosphorylation levels of ERK were detected by western blotting. Treatment with MCP led to a reduction in PAD4, Cit-H3, and MPO expressions in neutrophils, consequently inhibiting PMA-induced NET formation. MCP treatment also dampened ERK1/2 activation in neutrophils. Furthermore, MCP exhibited inhibitory effects on the secretion of the cytokine IL-8 and ROS production while enhancing neutrophil phagocytosis. Our findings suggest that MCP can mitigate the release of NETs, likely by suppressing the ERK1/2 signaling pathway.
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