Establishment and Validation of an Optimized Analytical Method for Sodium Copper Chlorophyllin in Food Using HPLC and LC/MS

본 연구는 우리나라에서 식품 착색료로 이용되고 있는 동클로로필린 나트륨의 최적 분석법을 개발하기 위하여 수행되었다. 제외국의 동 클로로필린 나트륨 분석법을 검토하여 식품 중 동 클로로필린 나트륨 추출방법, HPLC-PDA를 이용한 기기분석 조건, LC/MS를 이용한 동 클로로필린 나트륨 유도체 분석을 통하여 동 클로로필린 나트륨 최적 분석법을 확립하고 분석법의 타당성을 검토한 결과는 다음과 같다. 동 클로로필린 나트륨은 Inertsil ODS-2 column과 1% 초산을 함유한 메탄올-물(97:3, v/v)을 이동상으로 HPLCPDA를 이용하여 405 nm에서 분석할 때 우수한 분리능과 머무름 시간, 재현성이 확보된 피크를 얻을 수 있었다. LC/MS를 이용하여 동 클로로필린 나트륨을 이루는 피크를 분석한 결과 동 이소클로린 e4가 주 피크의 구성성분임을 확인할 수 있었다. 확립된 분석법의 타당성을 검증하기 위해 직선성, 검출한계, 정량한계, 정밀도, 정확도, 회수율 및 실험실 간 교차검증을 실시한 결과, 직선성은 0~700 mg/kg범위에서 RSUP2/SUP=0.9999로 나타났고, 검출한계와 정량한계는 각각 0.1 mg/kg과 0.4 mg/kg으로 나타났다. 정밀도는 일간분석과 일내분석이 각각 1.6~8.1과 0.5~2.6으로 나타났고, 정확도는 일간분석과 일내분석이 각각 89.2~102.2%와 90.4~100.5%로 나타나 국제표준화기구의 기준에 근접하였다. 또한, 본 연구에서 개발한 전처리법으로 식품 중 함유된 동 클로로필린 나트륨 회수율 분석을 실시한 결과 수용성식품(캔디류)의 경우는 104~109%, 유지류(샐러드드레싱)의 경우 농도별로 104~119%로 나타나 식품 매트릭스별 회수율 평균이 95% 이상으로 매우 우수하였다. 실험실 간 교차검증을 실시한 결과 세 기관의 R2값은 모두 0.998 이상으로 좋았으며, 각 실험실 회수율에 대한 RSD 값이 농도별로 6~16%로 나타나 향후 공인 분석 방법으로 활용 가능하다는 것을 확인할 수 있었다.