Development of a CRISPR/Cas12a-mediated Aptasensor for Mpox Virus Antigen Detection

清脆的 计算生物学 病毒学 抗原 计算机科学 生物 遗传学 基因
作者
Cong Han,Qirui Liu,Xunrong Luo,Jian Zhao,Zheng Zhang,Jiabei He,Feng Ge,Wei Ding,Luo Z,Jia Cao,Liyun Zhang
出处
期刊:Biosensors and Bioelectronics [Elsevier]
卷期号:: 116313-116313
标识
DOI:10.1016/j.bios.2024.116313
摘要

The emergence and rapid spread of Mpox (formerly monkeypox) have caused significant societal challenges. Adequate and appropriate diagnostics procedures are an urgent necessity. Herein, we discover a pair of aptamers through the systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX) that exhibit high affinity and bind to different sites towards the A29 protein of the Mpox virus. Subsequently, we propose a facile, sensitive, convenient CRISPR/Cas12a-mediated aptasensor for detecting the A29 antigen. The procedure employs the bivalent aptamers recognition, which induces the formation of a proximity switch probe and initiates subsequent cascade strand displacement reactions, then triggers CRISPR/Cas12a DNA trans-cleavage to achieve the sensitive detection of Mpox. Our method enables selective and ultrasensitive evaluation of the A29 protein within the range of 1 ng mL-1 to 1 μg mL-1, with a limit of detection (LOD) at 0.28 ng mL-1. Moreover, spiked A29 protein recovery exceeds 96.9%, while the detection activity remains above 91.9% after six months of storage at 4 °C. This aptasensor provides a novel avenue for exploring clinical diagnosis in cases involving Mpox as facilitating development in various analyte sensors.
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