A novel electrochemical aptasensor based on arch-shape structure of aptamer-complimentary strand conjugate and exonuclease I for sensitive detection of streptomycin

适体 链霉素 结合 核酸外切酶 检出限 化学 电化学 电极 核酸外切酶 III 选择性 组合化学 材料科学 DNA 色谱法 大肠杆菌 生物化学 生物 分子生物学 抗生素 数学分析 数学 物理化学 基因 催化作用 DNA聚合酶
作者
Noor Mohammad Danesh,Mohammad Ramezani,Ahmad Sarreshtehdar Emrani,Khalil Abnous,Seyed Mohammad Taghdisi
出处
期刊:Biosensors and Bioelectronics [Elsevier BV]
卷期号:75: 123-128 被引量:145
标识
DOI:10.1016/j.bios.2015.08.017
摘要

Detection and quantitation of antibiotic residues in blood serum and animal foodstuffs are of great significance. In this study, an electrochemical aptasensor was developed for sensitive and selective detection of streptomycin, based on exonuclease I (Exo I), complimentary strand of aptamer (CS), Arch-shape structure of aptamer (Apt)-CS conjugate and gold electrode. The designed aptasensor inherits characteristics of gold including large surface area and high electrochemical conductivity, as well as high sensitivity and selectivity of aptamer toward its target, property of Arch-shape structure of Apt-CS conjugate to act as a gate and barrier for the access of redox probe to the surface of electrode and the function of Exo I as an enzyme which selectively digests the 3'-end of single stranded DNA (ssDNA). In the absence of streptomycin the gate remains closed. Thus, the electrochemical signal is weak. Upon addition of streptomycin, the Apt leaves the CS and binds to streptomycin and the Arch-shape structure is disassembled. Then, Exo I addition leads to a strong electrochemical signal. The designed electrochemical aptasensor exhibited high selectivity toward streptomycin with a limit of detection (LOD) as low as 11.4nM. Moreover, the developed electrochemical aptasensor was successfully used to detect streptomycin in milk and serum with LODs of 14.1 and 15.3nM, respectively.
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