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Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for <em>In Vitro</em> Decidualization

蜕膜化 间质细胞 子宫内膜 细胞生物学 基因敲除 生物 胚胎 蜕膜 蜕膜细胞 男科 细胞培养 内分泌学 癌症研究 医学 胎儿 遗传学 胎盘 怀孕
作者
Stephanie A. Michalski,Sangappa B. Chadchan,Emily S. Jungheim,Ramakrishna Kommagani
出处
期刊:Journal of Visualized Experiments [MyJoVE Corporation]
卷期号: (139) 被引量:14
标识
DOI:10.3791/57684
摘要

The differentiation of human endometrial stromal cells (HESC) from fibroblast-like appearance into secretory decidua is a transformation required for embryo implantation into the uterine lining of the maternal womb. Improper decidualization has been established as a root cause for implantation failure and subsequent early embryo miscarriage. Therefore, understanding the molecular mechanisms underlying decidualization is advantageous to improving the rate of successful births. In vivo based studies of artificial decidualization are often limiting due to ethical dilemmas associated with human research, as well as translational complications within animal models. As a result, in vitro assays through primary cell culture are often utilized to explore the modulation of decidualization via hormones. This study provides a detailed protocol for the isolation of HESC and subsequent artificial decidualization via the supplementation of hormones to the culturing medium. Further, this study provides a well-designed method to knockdown any gene of interest by utilizing lipid-based siRNA transfections. This protocol permits the optimization of culture purity as well as product yield, thereby maximizing the ability to utilize this model as a reliable method to understand the molecular mechanisms underlying decidualization, and the subsequent quantification of secreted agents by decidualized endometrial stromal cells.
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