Evaluation of an Alkaline Lysis Method for the Extraction of DNA from Whole Blood and Forensic Stains for STR Analysis

色谱法 血迹 移液管 溶解 DNA提取 裂解缓冲液 多路复用 毛细管电泳 DNA 碱裂解 污渍 化学 聚合酶链反应 生物 分子生物学 染色 生物化学 遗传学 基因 物理化学 dna疫苗 质粒
作者
Michael Klintschar,Franz Neuhuber
出处
期刊:Journal of Forensic Sciences [Wiley]
卷期号:45 (3): 14745J-14745J 被引量:69
标识
DOI:10.1520/jfs14745j
摘要

A modified alkaline lysis protocol for extracting DNA from forensically relevant specimens is evaluated and compared with the chelex 100 method. For whole blood, bloodstains and sperm stains, both methods yielded comparable results after amplification for a pentameric STR locus (HumCD4). The main advantages of the new method are: only approximately ten minutes and two pipetting steps are necessary and the expenses for the extraction are extremely low as only NaOH, TrisHCl buffer and a single microcentrifuge tube are required. Alkaline lysis also proved to yield DNA suitable for typing longer STRs by using dye-labeled primers and capillary electrophoresis. These advantages should render this protocol especially interesting for high-throughput laboratories in combination with multiplex PCR and fluorescent dye technology, although the storability of the extracts proved to be problematic.
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