Real-time PCR assay for measurement of mouse telomeres.

端粒 分子生物学 生物 实时聚合酶链反应 聚合酶链反应 DNA 限制性片段 基因 凝胶电泳 端粒结合蛋白 基因组DNA 遗传学 DNA结合蛋白 转录因子
作者
Ralph J Callicott,James E. Womack
出处
期刊:PubMed [National Institutes of Health]
卷期号:56 (1): 17-22 被引量:220
链接
标识
摘要

Measurement of telomeres by polymerase chain reaction (PCR) amplification has been problematic due to the formation of dimers by the primers designed to hybridize to the telomere repeats. Recently, a set of primers that overcome this problem has been created and used to develop an assay to measure human telomeres by real-time quantitative PCR. We modified this assay to measure mouse telomeres. Results showed that the primers do indeed amplify mammalian telomere repeats without forming dimers. Results obtained from the real-time quantitative PCR assay of mouse DNA were similar to terminal restriction fragment analysis by pulsed-field gel electrophoresis followed by Southern hybridization. The assay performed with mouse DNA in a similar manner as it performs with human DNA. Preliminary linkage mapping suggests a gene influencing telomere length on the X chromosome. This assay will aid in the study of telomere function and importance in diseases associated with aging and cancer formation.

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